Pure Saposhnikovia divaricata oalje foar kears en sjippe meitsjen gruthannel diffuser essensjele oalje nij foar reed burner diffusers

koarte beskriuwing:

 

2.1. Tarieding fan SDE

De rizomen fan SD waarden kocht as in droege krûd fan Hanherb Co. (Guri, Korea). De plantmaterialen waarden taksonomysk befêstige troch Dr Go-Ya Choi fan it Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). In voucher-eksimplaar (nûmer 2014 SDE-6) waard dellein yn it Koreaansk Herbarium fan Standard Herbal Resources. Droege rizomen fan SD (320 g) waarden twa kear ekstrahearre mei 70% ethanol (mei in 2 h reflux) en it ekstrakt waard doe konsintrearre ûnder fermindere druk. De decoction waard filtere, lyofilisearre en opslein by 4 ° C. De opbringst fan droege ekstrakten fan rau útgongsmaterialen wie 48,13% (w/w).

 

2.2. Kwantitative High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) Analyse

Chromatografyske analyze waard útfierd mei in HPLC-systeem (Waters Co., Milford, MA, USA) en in fotodiode-arraydetektor. Foar de HPLC-analyze fan SDE, de prim-O-glucosylcimifugin standert waard kocht fan it Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ensek-O-glucosylhamaudol en 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol waarden isolearre binnen ús laboratoarium en identifisearre troch spektrale analyzes, benammen troch NMR en MS.

SDE-samples (0.1 mg) waarden oplost yn 70% ethanol (10 mL). Chromatografyske skieding waard útfierd mei in XSelect HSS T3 C18 kolom (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, Feriene Steaten). De mobile faze bestie út acetonitril (A) en 0,1% acetic acid yn wetter (B) by in trochstreaming fan 1,0 mL / min. In multistep gradientprogramma waard brûkt as folget: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min), en 20-65% A (23-40 min.) ). De deteksjegolflingte waard skansearre op 210-400 nm en opnommen op 254 nm. It ynjeksjevolume wie 10,0μL. Standertoplossingen foar de bepaling fan trije chromonen waarden taret by in definitive konsintraasje fan 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31,125 mg/ml (4'-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol), en 31.125 mg/mL (sek-O-glucosylhamaudol) yn methanol en bewarre op 4 ° C.

2.3. Evaluaasje fan anty-inflammatoire aktiviteitIn vitro

2.3.1. Selkultuer en Sample Treatment

RAW 264.7-sellen waarden krigen fan 'e American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) en groeid yn DMEM-medium mei 1% antibiotika en 5.5% FBS. Sellen waarden ynkubeare yn in humidifisearre sfear fan 5% CO2 by 37 ° C. Om de sellen te stimulearjen, waard it medium ferfongen troch frisse DMEM-medium, en lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) by 1μg / ml waard tafoege yn 'e oanwêzigens of ôfwêzigens fan SDE (200 of 400μg/mL) foar in ekstra 24 oeren.

2.3.2. Bepaling fan stikstofoxide (NO), prostaglandine E2 (PGE2), tumor nekrose faktor-α(TNF-α), en Interleukin-6 (IL-6) produksje

Sellen waarden behannele mei SDE en stimulearre mei LPS foar 24 h. NO-produksje waard analysearre troch it mjitten fan nitrit mei it Griess-reagens neffens in eardere stúdzje [12]. Sekretion fan de inflammatoire cytokines PGE2, TNF-α, en IL-6 waard bepaald mei in ELISA kit (R & D systemen) neffens fabrikant ynstruksjes. De effekten fan SDE op NO en cytokineproduksje waarden bepaald op 540 nm of 450 nm mei in Wallac EnVision™microplate reader (PerkinElmer).

2.4. Evaluaasje fan Antiosteoarthritis-aktiviteitYn Vivo

2.4.1. Bisten

Manlike Sprague-Dawley-ratten (7 wiken âld) waarden kocht fan Samtako Inc.°C en% vochtigheid. Ratten waarden foarsjoen fan in laboratoarium dieet en wetterad libitum. Alle eksperimintele prosedueres waarden útfierd yn oerienstimming mei de rjochtlinen fan 'e National Institutes of Health (NIH) en goedkard troch de Animal Care and Use Committee fan' e Daejeon-universiteit (Daejeon, republyk Korea).

2.4.2. Ynduksje fan OA mei MIA yn Ratten

De bisten waarden randomisearre en tawiisd oan behannelinggroepen foar it begjin fan 'e stúdzje (per groep). MIA-oplossing (3 mg/50μL fan 0.9% saline) waard direkt ynjeksje yn 'e intra-artikulêre romte fan' e rjochter knibbel ûnder anaesthesia feroarsake mei in mingsel fan ketamine en xylazine. Ratten waarden willekeurich ferdield yn fjouwer groepen: (1) de saline-groep sûnder MIA-ynjeksje, (2) de MIA-groep mei MIA-ynjeksje, (3) de SDE-behannele groep (200 mg / kg) mei MIA-ynjeksje, en (4) ) de indomethacin- (IM-) behannele groep (2 mg / kg) mei MIA-ynjeksje. Ratten waarden mûnling mei SDE en IM 1 wike foar MIA-ynjeksje foar 4 wiken administraasje. De dosaasje fan SDE en IM brûkt yn dizze stúdzje wie basearre op dy brûkt yn eardere stúdzjes [10,13,14].

2.4.3. Ofmjittings fan Hindpaw Weight-Bearing Distribution

Nei OA-ynduksje waard it orizjinele lykwicht yn gewichtdragende kapasiteit fan hindpoaten fersteurd. In incapacitance tester (Linton ynstrumintaasje, Norfolk, UK) waard brûkt om te evaluearjen feroarings yn de gewicht-bearing tolerânsje. Ratten waarden foarsichtich yn 'e mjitkeamer pleatst. De gewicht-dragende krêft útoefene troch de efterste limb waard gemiddeld oer in 3 s perioade. De gewichtferdielingsferhâlding waard berekkene troch de folgjende fergeliking: [gewicht op rjochter efterste lid / (gewicht op rjochter efterste lid + gewicht op lofter efterste lid)] × 100 [15].

2.4.4. Mjittingen fan serum cytokinenivo's

De bloedmonsters waarden sintrifuge op 1.500 g foar 10 min by 4 ° C; dan waard it serum sammele en opslein by -70 ° C oant gebrûk. It nivo fan IL-1βIL-6, TNF-α, en PGE2 yn it serum waarden mjitten mei ELISA-kits fan R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) neffens fabrikant ynstruksjes.

2.4.5. Real-Time Quantitative RT-PCR Analysis

Totaal RNA waard ekstrahearre út knibbelgewrichtweefsel mei it TRI-reagens® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, FS), reverse-transkribearre yn cDNA en PCR-amplified mei in TM One Step RT PCR-kit mei SYBR grien (Applied Biosystems) , Grand Island, NY, Feriene Steaten). Real-time kwantitative PCR waard útfierd mei it Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systeem (Applied Biosystems, Grand Island, NY, FS). De primer-sekwinsjes en de probe-sekwinsje wurde werjûn yn tabel1. Aliquots fan sample cDNA's en in gelikense hoemannichte GAPDH cDNA waarden fersterke mei it TaqMan® Universal PCR-mastergemik mei DNA-polymerase neffens fabrikant ynstruksjes (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR-betingsten wiene 2 min by 50 ° C, 10 min by 94 ° C, 15 s by 95 ° C, en 1 min by 60 ° C foar 40 syklusen. De konsintraasje fan doelgen waard bepaald mei de ferlykjende Ct (drompelsyklusnûmer op krúspunt tusken amplifikaasjeplot en drompel) metoade, neffens fabrikant ynstruksjes.

FOB Priis:US $0.5 - 9.999 / stik

Min. Order Quantity:100 Pieces / Pieces

Supply Mooglikheid:10000 Piece / Pieces per moanne