Artrose (OA) is ien fan 'e langduorjende groanyske degenerative bonke- en gewrichtssykten dy't de âldere befolking boppe de 65 treft [
1]. Yn 't algemien wurde OA-pasjinten diagnostisearre mei skansearre kraakbeen, ûntstoken synovium en erodearre chondrocyten, dy't pine en fysike lijen feroarsaakje [
2]. Artritispine wurdt foaral feroarsake troch de degeneraasje fan kraakbeen yn gewrichten troch ûntstekking, en as it kraakbeen slim skansearre is, kinne bonken mei-inoar botsje, wêrtroch't ûndraachlike pine en fysike swierrichheden ûntsteane [
3]. De belutsenens fan inflammatoire mediatoren mei symptomen lykas pine, swelling en stivens fan it gewricht is goed dokumintearre. By OA-pasjinten wurde inflammatoire cytokines, dy't de eroazje fan kraakbeen en subchondrale bonke feroarsaakje, fûn yn 'e synoviale floeistof [
4Twa wichtige klachten dy't OA-pasjinten oer it algemien hawwe binne pine en synoviale ûntstekking. Dêrom binne de primêre doelen fan 'e hjoeddeistige OA-terapyen it ferminderjen fan pine en ûntstekking. [
5]. Hoewol't de beskikbere OA-behannelingen, ynklusyf net-steroïde en steroïde medisinen, bewiisd effektyf binne yn it ferminderjen fan pine en ûntstekking, hat it lange-termyn gebrûk fan dizze medisinen serieuze gefolgen foar de sûnens, lykas kardiovaskulêre, gastrointestinale en nierdysfunksjes [
6]. Dêrom moat in effektiver medisyn mei minder side-effekten ûntwikkele wurde foar de behanneling fan artrose.
Natuerlike sûnensprodukten wurde hieltyd populêrder om't se feilich en maklik beskikber binne [
7Tradisjonele Koreaanske medisinen hawwe bewiisd effektyf te wêzen tsjin ferskate ûntstekkingssykten, ynklusyf artritis [
8]. Aucklandia lappa DC. is bekend om syn medisinale eigenskippen, lykas it ferbetterjen fan 'e sirkulaasje fan qi foar it ferminderjen fan pine en it kalmeren fan 'e mage, en is tradisjoneel brûkt as in natuerlik pijnstiller [
9Eardere rapporten suggerearje dat A. lappa ûntstekkingsremmende eigenskippen hat [
10,
11], pijnstiller [
12], antykanker [
13], en gastroprotektive [
14] effekten. De ferskate biologyske aktiviteiten fan A. lappa wurde feroarsake troch syn wichtichste aktive ferbiningen: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone en costuslactone [
15Eardere stúdzjes beweare dat costunolide anty-inflammatoire eigenskippen sjen liet yn lipopolysaccharide (LPS), dy't de makrofagen ynducearren troch de regeling fan NF-kB en de waarmteskokproteinpaad [
16,
17]. Gjin stúdzje hat lykwols de potinsjele aktiviteiten fan A. lappa foar OA-behanneling ûndersocht. It hjoeddeiske ûndersyk hat de terapeutyske effekten fan A. lappa tsjin OA ûndersocht mei help fan (mononatrium-jodoasetaat) MIA en jittiksoer-induzearre knaagdiermodellen.
Mononatriumjodoasetaat (MIA) wurdt ferneamd brûkt om in protte fan 'e pyngedrach en de patofysiologyske skaaimerken fan OA by bisten te produsearjen [
18,
19,
20]. As MIA yn 'e knibbelgewrichten ynjektearre wurdt, fersteurt it it metabolisme fan chondrocyten en feroarsaket it ûntstekking en ûntstekkingssymptomen, lykas kraakbeen- en subchondrale bonkeroaze, de wichtichste symptomen fan OA [
18]. Writhing-reaksje feroarsake mei jittiksoer wurdt breed beskôge as de simulaasje fan perifeare pine by bisten wêrby't de ûntstekkingspine kwantitatyf metten wurde kin [
19De mûsmakrofaagselline, RAW264.7, wurdt populêr brûkt om de sellulêre reaksjes op ûntstekking te bestudearjen. Nei aktivearring mei LPS aktivearje RAW264-makrofagen ûntstekkingspaden en skiede ferskate ûntstekkingsmiddels út, lykas TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS en IL-6 [
20Dizze stúdzje hat de anty-nociceptive en anty-inflammatoire effekten fan A. lappa tsjin OA evaluearre yn MIA-diermodel, azijnzuur-induzearre diermodel, en LPS-aktivearre RAW264.7-sellen.
2. Materialen en Metoaden
2.1. Plantmateriaal
De droege woartel fan A. lappa DC. dy't yn it eksperimint brûkt waard, waard oanskaft fan Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). It waard identifisearre troch prof. Donghun Lee, ôfdieling krûdefarmakology, kol. Koreaanske medisinen, Gachon Universiteit, en it bon-eksimplaarnûmer waard deponearre as 18060301.
2.2. HPLC-analyse fan A. lappa-ekstrakt
A. lappa waard ekstrahearre mei in refluxapparaat (destillearre wetter, 3 oeren by 100 °C). De ekstrahearre oplossing waard filtere en kondinsearre mei in leechdrukferdamper. A. lappa-ekstrakt hie in opbringst fan 44,69% nei friezedroeging ûnder −80 °C. Chromatografyske analyze fan A. lappa waard útfierd mei in HPLC ferbûn mei in 1260 InfinityⅡ HPLC-systeem (Agilent, Pal Alto, CA, Feriene Steaten). Foar chromatyske skieding waard EclipseXDB C18-kolom (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) brûkt by 35 °C. In totaal fan 100 mg fan it monster waard ferdund yn 10 mL 50% methanol en sonikearre foar 10 minuten. De samples waarden filtere mei in spuitfilter (Waters Corp., Milford, MA, Feriene Steaten) fan 0,45 μm. De gearstalling fan 'e mobile faze wie 0,1% fosforsoer (A) en acetonitril (B) en de kolom waard as folget eluearre: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% oplosmiddel B mei in streamsnelheid fan 1,0 mL/min. It effluent waard waarnommen by 210 nm mei in ynjeksjevolume fan 10 μL. De analyze waard yn triplikaat útfierd.
2.3. Húsfesting en behear fan bisten
Manlike Sprague-Dawley (SD) rotten fan 5 wiken âld en manlike ICR-mûzen fan 6 wiken âld waarden kocht fan Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). De bisten waarden hâlden yn in keamer mei in konstante temperatuer (22 ± 2 °C) en fochtigens (55 ± 10%) en in ljocht/tsjuster-syklus fan 12/12 oeren. De bisten waarden mear as in wike foar it begjin fan it eksperimint fertroud makke mei de omstannichheden. De bisten krigen in ad libitum oanfier fan fieding en wetter. De hjoeddeiske etyske regels foar bistefersoarging en -ôfhanneling oan 'e Gachon Universiteit (GIACUC-R2019003) waarden strang folge yn alle bisteproefprosedueres. De stúdzje wie ûntworpen as ûndersikerblinde en parallelle proef. Wy folgen de eutanasjemetoade neffens de rjochtlinen fan 'e Etyske Kommisje foar Diereeksperiminten.
2.4. MIA-ynjeksje en behanneling
Rotten waarden willekeurich ferdield yn 4 groepen, nammentlik sham, kontrôle, indometacine, en A. lappa. Nei't se anaesthesia ûndergien wiene mei in 2% isofluoraan O2-mingsel, waarden de rotten ynjeksjeare mei 50 μL MIA (40 mg/m²; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Feriene Steaten) intra-artikulêr yn 'e knibbelgewrichten om te lieden ta eksperimintele OA. De behannelingen waarden as hjirûnder útfierd: kontrôle- en shamgroepen krigen allinich it AIN-93G basisdieet. Allinnich de indometacinegroep krige indometacine (3 mg/kg) yn it AIN-93G-dieet, en de A. lappa 300 mg/kg-groep waard tawiisd oan it AIN-93G-dieet oanfolle mei A. lappa (300 mg/kg). De behannelingen waarden 24 dagen trochset sûnt de dei fan OA-ynduksje mei in taryf fan 15-17 g per 190-210 g lichemsgewicht op deistige basis.
2.5. Gewichtdragende mjitting
Nei OA-ynduksje waard de draachkapasiteitsmjitting fan 'e efterpoaten fan 'e rotten útfierd mei de incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, Feriene Steaten) neffens plan. De gewichtsferdieling oer de efterpoaten waard berekkene: draachkapasiteit (%)
