Osteoarthritis (OA) is ien fan 'e lange termyn chronike degenerative bonkengewrichtssykten dy't de âldere befolking oer 65 jier beynfloedzje.
1]. Yn 't algemien wurde OA-pasjinten diagnostearre mei skansearre kraakbeen, ûntsteane synovium, en erodearre chondrocytes, dy't pine en fysike need útlizze.
2]. Arthrityske pine wurdt foaral feroarsake troch de degeneraasje fan kraakbeen yn gewrichten troch ûntstekking, en as it kraakbeen serieus skansearre is, kinne bonken mei elkoar botse, wêrtroch ûndraaglike pine en fysike swierrichheden feroarsaakje.
3]. De belutsenens fan inflammatoire mediators mei symptomen lykas pine, swelling en stivens fan 'e mienskip is goed dokumintearre. Yn OA-pasjinten binne inflammatoare cytokines, dy't de eroazje fan kraakbeen en subchondrale bonken feroarsaakje, fûn yn 'e synoviale floeistof.
4]. Twa grutte klachten dy't OA-pasjinten yn 't algemien hawwe binne pine en synoviale ûntstekking. Dêrom binne de primêre doelen fan 'e hjoeddeistige OA-terapyen om pine en ûntstekking te ferleegjen. [
5]. Hoewol de beskikbere OA-behannelingen, ynklusyf net-steroïdale en steroidale medisinen, bewezen effektiviteit hawwe yn it ferminderjen fan pine en ûntstekking, hawwe it lange termyn gebrûk fan dizze medisinen serieuze sûnenskonsekwinsjes lykas kardiovaskulêre, gastro-intestinale en renale dysfunksjes.
6]. Sa moat in effektiver medisyn mei minder by-effekten ûntwikkele wurde foar de behanneling fan osteoarthritis.
Natuerlike sûnensprodukten wurde hieltyd populêrder om feilich en maklik beskikber te wêzen [
7]. Tradysjonele Koreaanske medisinen hawwe bewiisd effektiviteit tsjin ferskate inflammatoire sykten, ynklusyf artritis [
8]. Aucklandia lapa DC. is bekend om syn medisinale eigenskippen, lykas it ferbetterjen fan de sirkulaasje fan qi foar it ferlienen fan pine en kalmearjen fan 'e mage, en is tradisjoneel brûkt as in natuerlik analgetika.
9]. Foarige rapporten suggerearje dat A. lappa anti-inflammatoire hat [
10,
11], analgetika [
12], antykanker [
13], en gastroprotective [
14] effekten. De ferskate biologyske aktiviteiten fan A. lappa wurde feroarsake troch syn wichtichste aktive ferbiningen: costunolide, dehydrocostus lacton, dihydrocostunolide, costuslacton, α-costol, saussurea lacton en costuslacton [
15]. Eardere ûndersiken beweare dat costunolide anty-inflammatoare eigenskippen toande yn lipopolysaccharide (LPS), dy't de makrofagen feroarsake troch de regeling fan NF-kB en heat shock proteïnepaad.
16,
17]. Gjin stúdzje hat lykwols de potensjele aktiviteiten fan A. lappa ûndersocht foar OA-behanneling. It hjoeddeiske ûndersyk hat de therapeutyske effekten fan A. lappa tsjin OA ûndersocht mei (monosodium-iodoacetate) MIA en acetic acid-induzearre rodentmodellen.
Monosodium-iodoacetate (MIA) wurdt ferneamd brûkt om in protte fan 'e pinegedrach en de pathofysiologyske skaaimerken fan OA yn bisten te produsearjen.
18,
19,
20]. Wannear't ynjeksje yn knibbelgewrichten, disarrays MIA it chondrocyte metabolisme en induces ûntstekking en inflammatoire symptomen, lykas kraakbeen en subchondrale bonken eroazje, de kardinale symptomen fan OA [
18]. Writing-antwurd feroarsake mei acetic acid wurdt rûnom beskôge as de simulaasje fan perifeare pine yn bisten wêr't de inflammatoire pine kwantitatyf kin wurde mjitten [
19]. De mûsmakrophage-selline, RAW264.7, wurdt populêr brûkt om de sellulêre reaksjes op ûntstekking te studearjen. By aktivearring mei LPS, RAW264 makrofagen aktivearje inflammatoire paden en sekretearje ferskate inflammatoire intermediaries, lykas TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, en IL-6 [
20]. Dizze stúdzje hat de anty-nociceptive en anty-inflammatoare effekten fan A. lappa tsjin OA yn MIA-diermodel, acetic acid-induzearre diermodel, en LPS-aktivearre RAW264.7-sellen evaluearre.
2. Materialen en metoaden
2.1. Plant materiaal
De droege woartel fan A. lappa DC. brûkt yn it eksperimint waard oanskaft fan Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). It waard identifisearre troch prof. Donghun Lee, Dept. of Herbal pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, en it voucher-eksimplaarnûmer waard dellein as 18060301.
2.2. HPLC Analyse fan A. lappa Extract
A. lappa waard ekstrahearre mei in refluxapparaat (destillearre wetter, 3 h op 100 °C). De ekstrahearre oplossing waard filtrearre en kondinsearre mei in lege druk evaporator. A. lappa extract hie in opbringst fan 44,69% nei freeze-droegjen ûnder -80 °C. Chromatografyske analyze fan A. lappa waard útfierd mei in HPLC ferbûn mei in 1260 InfinityⅡ HPLC-systeem (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Foar chromatyske skieding waard EclipseXDB C18 kolom (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) brûkt by 35 ° C. In totaal fan 100 mg fan it eksimplaar waard verdund yn 10 mL 50% methanol en sonicated foar 10 min. Samples waarden filtere mei in syringe filter (Waters Corp., Milford, MA, USA) fan 0.45 μm. De mobile faze gearstalling wie 0,1% phosphoric acid (A) en acetonitril (B) en de kolom waard eluted as folget: 0-60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% oplosmiddel B mei in trochstreaming fan 1.0 mL/min. De effluent waard waarnommen by 210 nm mei in ynjeksjevolume fan 10 μL. De analyze waard útfierd yn triplicate.
2.3. Dieren húsfesting en behear
Male Sprague-Dawley (SD) ratten fan 5 wiken en manlike ICR-mûzen fan 6 wiken waarden kocht fan Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Dieren waarden hâlden yn in keamer mei konstante temperatuer (22 ± 2 ° C) en fochtigens (55 ± 10%) en in ljocht / tsjuster syklus fan 12/12 h. De bisten wiene bekend mei de betingst foar mear as in wike foardat it eksperimint begûn. Dieren hienen in ad libitum oanbod fan fied en wetter. De hjoeddeistige etyske regels foar diersoarch en behanneling oan 'e Gachon University (GIACUC-R2019003) waarden strikt folge yn alle diereksperimintele prosedueres. De stúdzje waard ûntworpen ûndersiker-blinde en parallele proef. Wy folgen de eutanasymetoade neffens de rjochtlinen fan de Animal Experimental Ethics Committee.
2.4. MIA ynjeksje en behanneling
Ratten waarden willekeurich skieden yn 4 groepen, nammentlik sham, kontrôle, indomethacin, en A. lappa. As anesthetisearre mei 2% isofluorane O2-gemik, waarden de ratten ynjeksje mei 50 μL fan MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-artikulêr yn 'e knibbels om te lieden ta eksperimintele OA. De behannelingen waarden útfierd as hjirûnder: kontrôle- en skamgroepen waarden allinich bewarre mei AIN-93G basisdieet. Allinnich, indomethacin groep waard foarsjoen fan indomethacin (3 mg / kg) opnommen yn AIN-93G dieet en A. lappa 300 mg / kg groep waard tawiisd oan AIN-93G dieet oanfolle mei A. lappa (300 mg / kg). De behannelingen waarden trochset foar 24 dagen sûnt de dei fan OA-ynduksje mei it taryf fan 15-17 g per 190-210 g lichemsgewicht op deistige basis.
2.5. Gewicht Bearing Measurement
Nei OA-ynduksje waard mjitting fan gewichtdragende kapasiteit fan efterste ledematen fan 'e ratten útfierd mei de incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) lykas pland. De gewichtferdieling op efterste ledematen waard berekkene: gewicht draachfermogen (%)